期刊简介

               1985年创刊,中国科协主管,中华医学会主办,中山大学附属第一医院承办。本刊是我国内儿科肾脏病学科领域高水平的专业期刊,对促进肾脏病学术交流及发展,起着重要的指导作用。本刊报道我国肾脏病领域领先的科研成果及临床诊疗经验。主要栏目有述评、论著、短篇论著、讲座、综述、临床病理(病例)讨论、病例报告、经验交流、会议纪要、国际学术动态。本刊的办刊宗旨:理论与实践相结合,基础与临床相结合,普及与提高相结合,为培养我国的肾脏病医学人才服务,为我国肾脏病患者的健康服务。读者对象:内科及儿科肾脏病临床和先关科研教学人员。                

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  • 杂志名称:中华肾脏病杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1001-7097
  • 国内刊号:44-1217/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华肾脏病杂志2009年第06期

基于慢病毒的SHARP-2特异的RNA干扰延长肾移植受者大鼠存活时间

寿张飞;肖华婴;徐义芳;王远志;杨毅;姜虹;王慧萍;陈莹;李一文;陈江华

关键词:慢病毒属, 慢病毒感染, RNA干扰, 肾移植, 干扰素Ⅱ型, 白细胞介素2, SHARP-2
摘要:目的 研究SHARP-2(rat enhancer of split-and hairy-related protein-2)特异性基因沉默后对白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)基因表达及肾移植受者大鼠存活时间的影响.方法 采用基因重组、转染、共转染等分子生物学方法将针对SHARP-2的短发夹式RNA干扰序列导入到第3代自失活慢病毒载体ViraPower packaging mix,以构建重组慢病毒;有限稀释法确定病毒滴度;实时定量PCR法研究基因表达变化;原位大鼠肾移植模型研究SHARP-2基因沉默后受者存活间变化.结果 在正常大鼠肾脏细胞中,重组慢病毒LV-SHARP-2iC对SHARP-2的基因沉默效率达84%.在复感染指数(MOI)=20时,用spinoculation 法可使57%的T细胞受转染.在活化T细胞中,SHARP-2基因沉默后对IL-2和IFN-γ的基因表达抑制率分别达61.3%和68.7%.和空白对照以及随意序列对照组相比,5×10<'7>TU SHARP-2特异的RNA干扰重组慢病毒LV-SHARP-2iC灌汴供肾后,肾移植受者大鼠的中位存活时间延长4~5 d.移植肾局部组织分析发现SHARP-2基因沉默效果达61%,IL一2和IFN-γ的基因表达则分别下降了47.3%和58.2%.结论 成功构建了以第3代自失活慢病毒为载体的、针对SHARP-2基因的短发夹式RNA干扰重组病毒LV-SHARP-2iC,该体系能使SHARP-2基因表达有效沉默,进而抑制活化T细胞中与排斥相关的IL-2和IFN-γ的基因表达,在肾移植模型中延长受者大鼠存活时间.