期刊简介
1985年创刊，中国科协主管，中华医学会主办，中山大学附属第一医院承办。本刊是我国内儿科肾脏病学科领域高水平的专业期刊，对促进肾脏病学术交流及发展，起着重要的指导作用。本刊报道我国肾脏病领域领先的科研成果及临床诊疗经验。主要栏目有述评、论著、短篇论著、讲座、综述、临床病理（病例）讨论、病例报告、经验交流、会议纪要、国际学术动态。本刊的办刊宗旨：理论与实践相结合，基础与临床相结合，普及与提高相结合，为培养我国的肾脏病医学人才服务，为我国肾脏病患者的健康服务。读者对象：内科及儿科肾脏病临床和先关科研教学人员。
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首页>中华肾脏病杂志
- 杂志名称：中华肾脏病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-7097
- 国内刊号：44-1217/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
钠-氢交换蛋白1小干扰RNA对抗霉素A诱导人肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护机制
洪权；吴镝；冯哲；张雪光；汪杨；吕杨；陈香美
关键词：钠氢交换子1, 缺血, 再灌注损伤, 肾小管上皮细胞, 细胞凋亡
摘要：目的 通过构建钠-氢交换蛋白1(NHE-1)小干扰RNA(siRNA)抑制肾小管上皮细胞NHE-1的表达,探讨其对细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法 根据人NHE-1全长基因序列设计并合成NHE-1-siRNA,转染人肾小管上皮细胞系(HKC),以无关siRNA转染组作为对照.利用10 μmol/L抗霉素A诱导细胞来模拟缺血缺氧环境.用RT-PCR、Western印迹法检测NHE-1的表达.用BCECF/AM、Fluo-3/AM和SBFI-AM标记HKC,通过激光共聚焦显微镜分别检测其细胞内pHi、Ca2+和Na+浓度的变化.用Hoechst 33342染色技术及AnnexinV/PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况.利用荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位的变化.结果 特异性NHE-1-siRNA能有效抑制HKC的NHE-1表达,与无关siRNA转染组相比,NHE-1-siRNA转染组NHE-1 mRNA和蛋白表达水平明显下调(均P＜0.05).抗霉素A刺激后,2组细胞NHE-1 mRNA及蛋白表达水平显著上调,而NHE-1-siRNA转染组低于无关siRNA转染组;同时NHE-1-siRNA转染组细胞凋亡率(8.9%±2.9%)明显低于抗霉素A处理组(18.8%±3.2%)和抗霉素A+无关siRNA转染组(17.4%±3.6%)(均P＜0.05):NHE-1-siRNA转染组线粒体膜电位明显增高;与无关siRNA转染组相比较,NHE-1-siRNA转染组经抗霉素A处理后,细胞内钠离子、氢离子及钙离子增高的幅度较低(P＜0.05).结论 NHE-1-siRNA可抑制肾小管上皮细胞内NHE-1的表达,对抗霉素A诱导肾小管上皮细胞的缺血再灌性损伤有一定的保护作用.其机制可能通过抑制NHE-1表达,延缓细胞内Na+的积聚,减轻细胞内钙离子的超载,抑制损伤细胞的线粒体膜电位下降,减少细胞的凋亡.
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