期刊简介
1985年创刊，中国科协主管，中华医学会主办，中山大学附属第一医院承办。本刊是我国内儿科肾脏病学科领域高水平的专业期刊，对促进肾脏病学术交流及发展，起着重要的指导作用。本刊报道我国肾脏病领域领先的科研成果及临床诊疗经验。主要栏目有述评、论著、短篇论著、讲座、综述、临床病理（病例）讨论、病例报告、经验交流、会议纪要、国际学术动态。本刊的办刊宗旨：理论与实践相结合，基础与临床相结合，普及与提高相结合，为培养我国的肾脏病医学人才服务，为我国肾脏病患者的健康服务。读者对象：内科及儿科肾脏病临床和先关科研教学人员。
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首页>中华肾脏病杂志
- 杂志名称：中华肾脏病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-7097
- 国内刊号：44-1217/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
基质金属蛋白酶1组织抑制剂短发夹式RNA对肾小球系膜细胞凋亡及细胞外基质的影响
孙艳玲；林洪丽；吴泰华；王楠；于长青；李龙凯；王静
关键词：金属蛋白酶1组织抑制剂, RNA干扰, 细胞凋亡, 细胞外基质, 肾小球系膜细胞
摘要：目的构建靶向基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)的短发夹RNA(shRNA)表达载体,并观察其对大鼠肾小球系膜细胞的凋亡和细胞外基质分泌的影响.方法构建携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的RNA干扰真核表达载体pEGFP-1/TIMP-1 shRNA,利用该载体介导两个TIMP-1 shRNA,分别为TIMP-1 shRNA1和TIMP-1 shRNA2.用荧光显微镜观察EGFP的表达.采用RT-PCR和Western印迹测定宿主细胞TIMP-1在基因和蛋白水平的沉默效果.用ELISA检测细胞外基质成份的表达.以流式细胞仪检测细胞的凋亡情况.结果(1)测序证实成功构建了针对TIMP-1的shRNA表达载体pEGFP-1/TIMP-1 shRNA;(2)荧光显微镜下,转染组细胞内均见绿色荧光;未转染组未见绿色荧光;(3)基因和蛋白水平的检测显示,与阴性对照组相比,TIMP-1 shRNA1组的TIMP-1明显受抑制(P＜0.05),TIMP-1 shRNA2组抑制效果不明显;(4)ELISA结果显示,正常对照组FN、Ⅳ型胶原蛋白和LN的表达不随时间的延长而变化;未转染组和阴性对照组在高糖诱导下,FN、Ⅳ型胶原蛋白和LN的表达随时间的延长而增加;48、72 h的shRNA1组、抗体组和反义组对FN、Ⅳ型胶原蛋白、LN表达明显低于阴性对照组,以shRNA1组明显;(5)流式细胞仪结果显示,高糖诱导的各组细胞凋亡率随时间的延长而升高.在同一时间点shRNA1组细胞的凋亡率高,反义组细胞的凋亡率次之,48 h和72 h的shRNA1组细胞的凋亡率与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论pEGFP-1介导的TIMP-1shRNA1能更加有效的抑制大鼠肾小球系膜细胞中TIMP-1的表达,促进肾小球系膜细胞的凋亡并使细胞外基质的成份表达下降.
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